Mycobacterium Tuberculosis Nukleinsyre- og Rifampicinresistens
Produktnavn
HWTS-RT074B-Mycobacterium Tuberculosis Resistensdetektionskit til nukleinsyre og rifampicin (smeltekurve)
Certifikat
CE
Epidemiologi
Mycobacterium tuberculosis, kort fortalt Tubercle bacillus, TB, er den patogene bakterie, der forårsager tuberkulose. I øjeblikket omfatter de almindeligt anvendte førstelinje-anti-tuberkulosemidler isoniazid, rifampicin og hexambutol osv. Anti-tuberkulosemidlerne omfatter fluorquinoloner, amikacin og kanamycin osv. De nyudviklede lægemidler er linezolid, bedaquilin og delamani osv. På grund af forkert brug af anti-tuberkulosemidler og karakteristikaene ved cellevægsstrukturen hos Mycobacterium tuberculosis udvikler Mycobacterium tuberculosis imidlertid resistens over for anti-tuberkulosemidler, hvilket medfører alvorlige udfordringer for forebyggelse og behandling af tuberkulose.
Rifampicin har været meget anvendt i behandlingen af patienter med lungetuberkulose siden slutningen af 1970'erne og har en betydelig effekt. Det har været førstevalget til at forkorte kemoterapien hos patienter med lungetuberkulose. Rifampicinresistens skyldes hovedsageligt mutationen af rpoB-genet. Selvom der konstant kommer nye anti-tuberkuloselægemidler, og den kliniske effekt hos patienter med lungetuberkulose også er fortsat med at forbedres, er der stadig en relativ mangel på anti-tuberkuloselægemidler, og fænomenet med irrationel lægemiddelbrug i klinisk praksis er relativt højt. Det er tydeligt, at Mycobacterium tuberculosis hos patienter med lungetuberkulose ikke kan dræbes fuldstændigt og rettidigt, hvilket i sidste ende fører til forskellige grader af lægemiddelresistens i patientens krop, forlænger sygdomsforløbet og øger risikoen for patientens død.
Kanal
Kanal | Kanaler og fluoroforer | Reaktionsbuffer A | Reaktionsbuffer B | Reaktionsbuffer C |
FAM-kanal | Reporter: FAM, Quencher: Ingen | rpoB 507-514 | rpoB 513-520 | 38KD og IS6110 |
CY5-kanal | Reporter: CY5, Quencher: Ingen | rpoB 520-527 | rpoB 527-533 | / |
HEX (VIC) Kanal | Reporter: HEX (VIC), Quencher: Ingen | Intern kontrol | Intern kontrol | Intern kontrol |
Tekniske parametre
Opbevaring | ≤-18 ℃ I mørke |
Holdbarhed | 12 måneder |
Prøvetype | Sputum |
CV | ≤5,0% |
LoD | Mycobacterium tuberculosis 50 bakterier/ml rifampicinresistent vildtype: 2x103bakterier/ml homozygot mutant: 2x103bakterier/ml |
Specificitet | Den detekterer vildtype Mycobacterium tuberculosis og mutationsstederne for andre lægemiddelresistensgener såsom katG 315G>C\A, InhA-15C>T. Testresultaterne viser ingen resistens over for rifampicin, hvilket betyder, at der ikke er nogen krydsreaktivitet. |
Anvendelige instrumenter: | SLAN-96P realtids-PCR-systemer BioRad CFX96 realtids-PCR-system LightCycler480® realtids-PCR-system |
Arbejdsgang
Hvis man bruger Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (som kan bruges sammen med Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) eller Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA Column (HWTS-3022-50) fra Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. til ekstraktion, tilsættes 200 μL af den positive kontrol, negative kontrol og den behandlede sputumprøve, der skal testes, i rækkefølge, og 10 μL af den interne kontrol tilsættes separat til den positive kontrol, negative kontrol og den behandlede sputumprøve, der skal testes. De efterfølgende trin skal udføres nøje i henhold til ekstraktionsvejledningen. Den ekstraherede prøvevolumen er 200 μL, og den anbefalede elueringsvolumen er 100 μL.